医学寄生虫学实验教程(第三版)

............篇实验总则（1）
单元实验总则（1）
一、 实验规则与注意事项（1）
二、 实验的进行程序与要求（2）
三、 光学显微镜的使用与维护（2）
四、 显微测微尺的使用（5）
五、 寄生虫标本的类别与实验方法（6）
六、 实验报告绘图要求（7）
第2单元寄生虫标本的采集与保存（9）
一、 粪便的采集与保存（9）
二、 标本的转送与邮寄（11）
第2篇医学蠕虫Medical helminth（12）
第3单元医学蠕虫概论（12）
第4单元线虫Nematode（15）
一、 似蚓蛔线虫 Ascaris lumbricoides（蛔虫roundworm）（15）
二、 毛首鞭形线虫Trichuris trichiura（鞭虫 whipworm）（20）
三、 十二指肠钩口线虫（十二指肠钩虫）Ancylostoma duodenale美洲板口线虫（美洲钩虫）Necator americanus（22）
四、 蠕形住肠线虫 Enterobius vermicularis（蛲虫 pinworm）（26）
五、 班氏吴策线虫（班氏丝虫）Wuchereria bancrofti马来布鲁线虫（马来丝虫）Brugia malayi（28）
六、 粪类圆线虫Strongyloides stercoralis（31）
七、 旋毛形线虫（旋毛虫）Trichinella spiralis（33）
八、 广州管圆线虫 Angiostrongylus cantonensis（36）
九、 结膜吸吮线虫 Thelazia callipaeda（38）
十、 美丽筒线虫 Gongylonema pulchrum（39）
第5单元吸虫 Trematode（41）
一、 华支睾吸虫 Clonorchis sinensis（42）
二、 布氏姜片吸虫 Fasciolopsis buski（45）
三、 卫氏并殖吸虫 Paragonimus westermani（47）
四、 斯氏并殖吸虫Paragonimus skrjabini（50）
五、 日本血吸虫Schistosoma japonicum（51）
第6单元绦虫 Cestode（59）
一、 链状带绦虫Taenia solium（猪带绦虫、猪*绦虫、有钩绦虫）（59）
二、 肥胖带绦虫 Taenia saginata（牛带绦虫、牛*绦虫、无钩绦虫）（62）
三、 细粒棘球绦虫（包生绦虫） Echinococcus granulosus（65）
四、 多房棘球绦虫Echinococcus multilocularis（泡状棘球绦虫）（69）
五、 微小膜壳绦虫（短膜壳绦虫） Hymenolepis nana（71）
六、 曼氏迭宫绦虫（孟氏裂头绦虫） Spirometra mansoni（73）
第7单元棘头虫 Acanthocephala（77）
猪巨吻棘头虫 Macracathorhynchus hirudinaceus（77）
第3篇医学原虫 Medical protozoa（79）
第8单元阿米巴 Amoeba（79）
一、 溶组织内阿米巴 Entamoeba histolytica（79）
二、 消化道其他阿米巴（84）
第9单元鞭毛虫Flagellate（88）
一、杜氏利什曼原虫 Leishmania donovani（88）
二、 锥虫 Trypanosome（90）
三、 蓝氏贾第鞭毛虫Giardia lamblia（92）
四、阴道毛滴虫Trichomonas vaginalis（94）
0单元孢子虫 Sporozoa（96）
一、 疟原虫 Plasmodium（96）
二、 刚地弓形虫 Toxoplasma gondii（101）
三、 隐孢子虫 Cryptosporidium（104）
1单元纤毛虫 Ciliate（105）
结肠小袋纤毛虫 Balantidium coli（105）
第4篇医学节肢动物Medical arthropod（107）
2单元医学昆虫 Medical insect（107）
一、 蚊 Mosquito（107）
二、 蝇 Fly（110）
三、 白蛉 Sand fly（112）
四、 蚤 Flea（115）
五、 虱 Louse（116）
六、臭虫 Bedbug、蜚蠊 Cockroach（118）
3单元医学蜱螨 Medical tick and mite（120）
一、蜱 tick（120）
二、 螨 Mite（122）
主要参考书目（126）
附医学节肢动物检索图
检索图1双翅目重要医学昆虫分科检索图
检索图2常见重要传病蚊种检索图
检索图3常见重要蚤种检索图
检索图4重要医学蜱螨检索图......篇实 验 总 则
医学寄生虫学实验教程
实验课是医学寄生虫学教学的重要组成部分，主要为验证性实验。通过实验可以巩固和加深对理论知识的理解，掌握和熟悉寄生虫的形态结构，接受寄生虫学基本实验技能的训练和掌握实验观察的基本方法，培养实事求是的科学态度和独立工作能力，为后续课程打下坚实的基础。
单元实 验 总 则
一、 实验规则与注意事项
实验室是供学生进行实验的重要场所。在实验室内，学生通过实物观察和技术操作，进一步理解、巩固和掌握理论课内容，掌握寄生虫检验、鉴定等基本技能。学生必须遵守实验室的有关规章制度。
（1） 每位学生必须严格遵守实验室规则。不得迟到、早退或无故缺席，有病或有事应向任课教师请假。
（2） 在实验室内不做与实验无关的事情。应保持肃静，保证实验室的良好秩序。实验过程中如有问题，应举手后再询问，不得高声呼叫、谈笑、喧哗或随意走动。
（3） 实验前，要认真检查所用仪器、器材、标本等是否完好、齐全，如有缺损应及时向教师报告，不得随意调换仪器、标本等。
（4） 操作时，按实验教程逐项进行。仔细观察标本，做好记录，充分了解观察物的特点。*眼观察的大体示教标本，不要随意移动。镜下示教标本，只在必要时，调节光源和微调焦钮，以免所示标本移位，影响其他学生观察。
（5） 注意节约，爱护设备和器材，不得随意摆弄室内仪器设备。爱惜标本，标本损坏应及时报告。
（6） 注意安全，保护环境。使用危险品或感染性病原体时，应严格按照操作规程进行，并注意防护。严禁随意丢弃感染性病原体或含有病原体的物品、动物尸体及排泄物等。
（7） 保持实验室整洁，禁止随地吐痰，禁止吸烟，禁止饮食。实验完毕后，学生应将实验台清理整洁，检查标本、器材，并按原位放好或送还标本室，如有遗失或损坏，应及时报告教师。每次实验结束，值日学生应做好实验室清洁，关好门、窗、水、电后再离开。
（8） 发生事故，应及时报告。发生重大事故时，应及时抢救受伤人员，尽力阻止事故扩大，并保护好事故现场。
二、 实验的进行程序与要求
（1） 预习：在课前，应认真预习实验教程以及教材的有关章节，必须对该次实验的内容、目的与要求、操作方法有一定的了解。
（2） 观看录像：一般在每次实验开始，先看录像，以便对实验内容有概括了解。
（3） 讲解：教师一般仅对该实验内容的安排及注意事项进行讲解，让学生有充分的时间按实验教程的要求进行独立操作与观察。
（4） 独立操作与观察：由学生独立进行操作和观察。在实验中要按实验教程认真操作，仔细观察，做好记录。有关基本技能的训练，要按操作程序反复练习，以达到一定的熟练程度。
（5） 示教：多数实验备有示教内容，其目的是使学生在实验课的有间内有获得更多知识的机会。
（6） 实验报告：实验报告必须强调科学性，实事求是地记录、绘制。在实验结束时，由学习委员将实验报告按学号排序，呈交教师。学生应认真阅读教师批改后的实验报告，不断提高实验质量。
（7） 小结：实验结束后，由师生共同小结本次实验的主要收获及今后应注意的问题。
三、 光学显微镜的使用与维护
1.普通光学显微镜的结构
普通光学显微镜由机械部分、照明部分和光学部分组成，其主要结构和部件名称参见图1-1。
图1-1光学显微镜结构示意图
2.低倍镜的使用方法
（1） 检查：右手握紧镜臂，左手托住底盘，轻轻放在实验桌上。先检查显微镜各部件有无缺损，如发现有损坏或性能不良者，立即报告教师请求处理。
（2） 准备：将显微镜放于操作者前方略偏左侧，转动粗调焦钮，将载物台略下降（或镜筒略升高），使物镜与载物台的距离略拉开。再旋转物镜转换器，将低倍镜对准载物台中央的通光孔（可听到“咔哒”声）。
（3） 对光：打圈，上升聚光器，双眼向目镜内观察，同时调节反光镜的方向（电光源显微镜无反光镜，应调节亮度调节柄），直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其他景物映入视野，一般用凹面镜对光。
（4） 放玻片标本：玻片标本的盖片向上，将玻片标本放到载物台前方，然后推到物镜下面，用压片夹压住，或用弹簧夹夹住，然后把要观察的部分移到通光孔的正中央。
（5） 调节焦距：从显微镜侧面注视物镜镜头，同时旋转粗调焦钮，使载物台缓慢上升（或镜筒下降），当低倍镜头与玻片之间的距离约5mm时，从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调焦钮，直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰，可转动细调焦钮，使物像更加清晰。调节焦距时，要认清物镜的放大倍数，不同放大倍数物镜的工作距离不同（图1-2）。
图1-2三种物镜及其工作距离
如果按上述操作步骤仍看不到物像，可能由以下原因造成：
◆ 转动调焦钮太快，超过焦点，应按上述步骤重新调节焦距。
◆ 物镜没有对正，重新对正后再观察。
◆ 标本没有放到视野内，应移动标本片，寻找观察对象。
◆ 光线太强，尤其观察比较透明的标本或没有染色的标本时，易出现这种现象，应将光线略调暗一些，再观察。在调节光线时，应重视聚光器的重要作用。一般地说，所用物镜的放大倍数越小，聚光器的位置越低。
3.高倍镜的使用方法
（1） 依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。
（2） 将需要观察的部分移到视野中央。
（3） 眼睛从侧面注视物镜，用手移动物镜转换器，换高倍镜。
（4） 眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调焦钮，直至视野内看到清晰的物像为止。
按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成：
◆ 拟观察的部分不在视野内，应在低倍镜下寻找到观察目标后，移到视野中央，再换高倍镜观察。
◆ 标本片放反（玻片的物面应向上），应把标本片放正后，再按上述步骤操作。
◆ 焦距调节不准确，应仔细调节焦距。
有的显微镜的高倍镜与低倍镜不够配套，从低倍镜转换至高倍镜时，往往转不过来或撞坏标本（物镜松动时，也有此现象），如遇到这种情况，可把载物台略下降（或镜筒略升高），直接用高倍镜调焦。方法是：从侧面注视物镜，调节粗调焦钮，使高倍镜头下降至与玻片*短距离，再观察目镜视野，慢慢调节细调焦钮，使镜头缓缓上升，直至物像清晰为止。
如需要更换标本时，应该先将载物台下降（或镜筒升高），然后把标本片移到载物台前方，再拨开压片夹，取出玻片。
4.油镜的使用方法
（1） 先按低倍镜→高倍镜的操作步骤，找到清晰的物像，把要放大观察的部分移到视野中央。调节聚光器上升到*处，光圈调大。
（2） 将高倍镜移开，在玻片标本的镜检部位滴1滴香柏油，眼睛从侧面注视镜头，轻轻转换油镜，使镜面浸在油滴中。在一般情况下，转过油镜上下微旋转细调焦钮，即可看清物像。如仍看不清，应按上述步骤重新操作。
（3） 油镜使用完毕后，下降载物台（或上升物镜）约10mm，把物镜转到一边，用擦镜纸把镜头擦净。油镜的正确擦拭是：先用干净擦镜纸（通常用双层）擦去镜头上的香柏油，再用蘸少许二甲苯（或乙醚7∶乙醇3混合液）的擦镜纸轻擦，再用干净的擦镜纸擦1～2次除去二甲苯。
（4） 封加盖片的玻片标本的擦拭方法同油镜。无盖片的玻片标本，可用拉纸法擦油。方法是：先用1小块擦镜纸覆盖在标本片的油滴上，再滴1滴二甲苯（或乙醚7∶乙醇3混合液），平拉擦镜纸，反复几次即可擦净。
5.显微镜使用的注意事项及维护
（1） 取显微镜时必须右手握紧镜臂，左手托底盘，切勿一手斜提、前后摆动，以防镜头或其他零件跌落。
（2） 观察标本时，显微镜离实验台边缘应保持一定距离（约5cm），以免显微镜翻倒落地。
（3） 使用时要严格按步骤操作，熟悉显微镜各部件性能，掌握粗、细调焦钮的转动方向与载物台或物镜的关系。转动粗调焦钮时，眼睛必须注视物镜头。
（4） 观察带有液体的临时标本时要加盖片，应将显微镜充分放平，以免液体污染镜头和显微镜。
（5） 粗、细调焦钮要配合使用，细调焦钮不能单方向过度旋转。调节焦距时，要从侧面注视物镜下降，以免压坏标本和损坏镜头。
（6） 用单筒显微镜观察标本时，应双眼同时睁开，左眼观察物像，右眼用以绘图。左手调节焦距，右手移动标本或绘图。
（7） 禁止随意拧开或调换目镜、物镜和聚光器等零件。
（8） 显微镜的光学部件不可用手指、纱布、手帕或其他粗糙物擦拭，以免磨损镜面。需要时只能用擦镜纸擦拭。
（9） 凡有腐蚀性和挥发性的化学试剂和药品，如碘、乙醇溶液、酸类、碱类等都不可与显微镜接触，如不慎污染时，应立即擦干净。
（10） 实验完毕，要将标本片取出，用擦镜纸将镜头擦拭干净后移开（通常转换4×物镜于镜下），不能与通光孔相对（把物镜转离聚光器上方）。将电源线收好，放回镜箱。切不可把显微镜放在直射光线下曝晒。
四、 显微测微尺的使用
1.显微测微尺的组成
寄生虫大小的测定，一般用显微测微尺。显微测微尺由目镜测微尺（ocular micrometer）和镜台测微尺（stage micrometer）组成（图1-3）。
（1） 目镜测微尺：简称目微尺，是1块直径20mm的圆形玻璃片。它上面有直线刻度或网格式标尺。网格式的目微尺可用来测量物体的体积。
（2） 镜台测微尺：简称台微尺，是1块特制的载玻片。其中央镶有1个刻度标尺，全长1mm，共划分成10个大格，每个大格又分成10个小格，共100个小格，每个小格长0.01mm，（10μm），在标尺的外围有1个黑色环，利于找到标尺的位置。
图1-3显微测微尺结构示意图
2.显微测微尺的使用
（1） 测微尺的安放：使用目微尺时，先将目镜从镜筒中抽出，旋去接目透镜，然后将目微尺放在目镜的光阑上。注意应将目微尺上有刻度的一面朝下，再将接目透镜旋上，把目镜插入镜筒，即可进行测量。
（2） 测微尺的标定：在测量标本的长度之前，必须首先对目微尺在不同放大倍数的物镜下进行标定。
目微尺的标定方法：将台微尺夹于载物台上，调焦直至能看到台微尺刻度。此时，目微尺和台微尺同时显示在视野中，转动目图1-4显微测微尺标定示意图
镜，使目微尺的标尺直线与台微尺的标尺直线尽量靠近、平行，*终使两直线重合，再移动台微尺，使两个微尺的左边一端平齐，然后从左到右找出两个微尺另一侧重合的直线（图1-4）。
分别计数重合线之间台微尺和目微尺各自包含的小格数，根据公式计算出目微尺每个小格的长度（格值）。公式如下：
目微尺每格值（μm）＝台微尺格数目微尺格数×10
公式中“10”表示台微尺每个小格长10μm。
例如，目微尺的第33格正好与台微尺的第22格重合，代入公式
目微尺每格值（μm）=2233×10＝6.6μm
为减少测量误差，应对目微尺的格值测量3次，求其平均值。如果更换不同放大率的镜头，必须重新标定目微尺，才能再次测量。标定完成，就可进行测定。
（3） 标本的测量与体积计算：测定时，取下台微尺，换上标本片，记录被检标本占目微尺的格数，然后乘以每个小格代表的长度。
例如，当用低倍镜测出某种寄生虫卵的长度为目微尺的4格，而已知每格等于6.6μm时，则该虫卵的长度为：6.6μm×4＝26.4μm。
根据测量结果，也可计算虫体各部分的体积或核质比例（如原虫），公式如下：
◆ 椭圆形：计算式为V＝4/3πab2（a、b为长、短半径）。
◆ 圆球形：计算式为V＝4/3πR3（R为半径）。
◆ 核质比例：计算式为Np＝Vn/（Vc-Vn）＝细胞质体积/细胞核体积（Vc为细胞体积，Vn为细胞质体积）。
五、 寄生虫标本的类别与实验方法
1.标本类别与观察方法
寄生虫标本一般分为大体标本（活体标本、甲醛固定标本、浸制标本）、针插标本和玻片标本（包括封片标本和染色标本）。观察时应分别采用不同方法。......《医学寄生虫学实验指导》为普通高等教育“十一五”*规划教材《医学寄生虫学》第4版（2014）的配套教材，也适于与本学科其他版《医学寄生虫学实验指导》配套使用。《医学寄生虫学实验指导》分为4篇：实验总则、医学蠕虫、医学原虫和医学节肢动物。依据高等医学院校五年制和长学制培养计划，重点描述了60余种严重危害人类健康的常见寄生虫和重要病媒节肢动物的形态学，详细介绍了实验诊断常用操作技术。《医学寄生虫学实验指导》彩印，有拍摄实体标本的寄生虫形态学彩色照片130余幅，形态逼真，图文并茂，附有医学节肢动物检索图4幅，可满足实验教学。..............................

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