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醉染图书实用神经变疾病物学实验方与技9787122276018
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章原代神经细胞培养和细胞功能测定/1节原代皮质和海马神经元培养1第二节新生小鼠中脑多巴胺能神经元培养3一、单层皮质星形胶质细胞表面培养新生鼠中脑多巴胺能神经元3二、单层星形胶质细胞表面培养新生鼠中脑多巴胺能神经元及形成神经突触9三、本节实验中使用到的试剂和溶液11四、注意事项13五、常见问题及解决方案13六、预期结果13七、时间因素14第三节小鼠神经干细胞培养14一、成年鼠神经干细胞培养14二、新生鼠海马神经干细胞的培养19三、胎鼠神经干细胞的培养20第四节原代神经胶质细胞培养21一、星形胶质细胞的分离和培养21二、新生鼠小胶质细胞的原代培养三、成年鼠小胶质细胞的分离和培养25第五节小胶质细胞功能实验29一、趋化和迁移实验29二、体外测定小胶质细胞吞噬功能(吞噬尼罗红微球/a突触核蛋白/Ab)30第二章模式动物行为学实验/34节Morris水迷宫34第二节Y-迷宫36第三节小鼠平衡功能实验39第四节抑郁模型的建立和评定40一、抑郁症的模型制作41二、抑郁动物的行为学评价45第五节嗅觉行为功能测定47一、埋藏食物小球实验48二、嗅觉迷宫48第六节大脑中动脉闭塞模型的建立和评定49第七节运动功能评定52一、小鼠肢体力量测试实验——小鼠抓力测试52二、小鼠耐力测试实验——跑台实验53第八节感觉(痛触觉)系统评估54一、VonFreyTest54二、智能热板仪56三、甩尾实验57第三章神经病理学实验/59节脑组织的取材、保存和标本制作59第二节脊髓组织的取材、保存和标本制作62一、脊髓的取材和保存62二、脊髓冰冻切片的制作64第三节小鼠脑脊液采集66第四节海马脑片场电位的神经电生理记录方法67第五节神经免疫组织化学和免疫荧光染色71第六节透视电镜标本制作74第七节老化组织相关病理特殊染色(SA-b-gal、银染色)77一、神经原纤维缠结(NFTs)染色77二、b-淀粉样蛋白染色80三、衰老相关b-半乳糖苷酶染色82第八节神经组织高尔基染色83第九节神经组织体视学分析技术86第十节共聚焦扫描及定量技术92一、激光共聚焦显微镜的成像原理92二、激光共聚焦显微镜在神经变疾病研究中的运用93三、激光共聚焦显微镜结构95四、基本扫描及图像获取95五、微分干涉差(DIC)扫描及图像获取102六、拼图扫描及图像获取103七、Z-Stack扫描及图像获取103八、时间序列扫描105九、激光共聚焦图像定量及后处理106第四章神经生化和基因检测/115节转基因动物的基因型鉴定、保种和管理115一、小鼠生殖生理115二、小鼠的生长周期116三、基因工程鼠饲养繁殖般程和注意事项116四、常用小鼠品系的概况117五、几种常用神经变疾病转基因鼠的介绍和鉴定118第二节神经组织蛋白检测125一、蛋白质印迹法125二、免疫共沉淀原理及步骤130三、动物脑组织匀浆检测Ab132第三节RNA提取及实时荧光定量PCR技术134一、RNA提取134二、RT-PCR135三、qPCR135第四节基因芯片检测140一、单核苷酸多态芯片实验140二、基因表达谱芯片检测142第五节荧光素酶报告基因技术分析启动子转录活143第六节荧光定量PCR法检测端粒酶活146第七节中枢神经系统突触和非突触线粒体的分离提取148第五章分子影像技术检测神经变疾病/157节PET/SPECT-CT显像探针的制备158第二节fMRI成像技术的原理及其实验设与据处理164一、fMRI实验设计164二、实验设备166三、实验数据处理166四、fMRI实验相关的准备169五、小结170第六章神经变疾病患者临床神经评估、样本保存和数据库建设/171节神经变疾病临床登记和数据库建立和实施171一、临床研究目标的确立171二、研究方案的确立172三、组织机构的建立173四、病例报告表(CRF)的建立174第二节神经变疾病患者血液、脑脊液组织样本的保存和处理177一、血液及血液成分的处理和保存178二、脑脊液的处理和保存179三、标本DNA的提取和保存180附表6-1标本保存详细记录180附表6-2关于使用组织样开展学研究的知情同意书181第三节神经心理认知障碍测试诊断系统182一、医生端系统182二、用户管理183三、临床病例登记183四、案例管理186五、统计打印190六、量表管理191第七章神经生物学常用分析及作图软件的应用/193节ImageJ神经生物分析软件的应用193一、ImageJ神经生物分析软件的基本功能193二、ImageJ神经生物分析软件分析免疫荧光定量技术197第二节GraphpaPis6.0作图和统计应用205一、折线图205二、直条图208三、生存曲线图216四、散点图219五、饼图225第三节Logistic回归、Cox风险模型以及Kaplan-Meier曲线的统计应用1一、Logistic回归分析和ROC工作曲线的制订1二、Cox回归分析三、Kaplan-Meier曲线分析242第四节EndNote×7的应用245一、文献管理245二、撰写245
潘晓东,医学博士,副主任医师、副教授、博士生导师。福建省老年医学研究所副所长,福建省医学会神经病学分会秘书及青年委员、神经变学组成员;福建省青年科学家学会成员;中国老年医学学会认知障碍分会委员会委员;中国研究型医院学会神经科学专业委员会委员;美国国立卫生研究院(NIH)/美国国立老化研究所(NIA)访问学者。专业方向:阿尔茨海默病、帕金森病等老年神经变疾病的基础和临床研究。近年主持承担3项自然科学及多项省厅级课题;发表SCI及论10余篇;主编专著2部。开发记忆障碍测试系统软件,建成神经认知心理障碍疾病诊断平台,获软件著作权1项、申请1项。2011年获“福建青年科技奖”、2013年获“福建运盛青年科技奖”荣誉。
实验流程严格按照美国国立卫生研究院(NIH)、国立老化研究所(NIA)的标准、规范执行包括实验技术的概述,材料准备、操作步骤、操作指导、思考、注意事项(包括实验结果不是想要的时的应急预案)、失败的经验或成功的经验总结等图文结合介绍Image J 神经生物分析软件、GraphPad Prism 6.0软件、SPSS软件的应用按本书的指导,可以提高实验效率,分析统计实验结果。
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