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目录
1 绪论 1
1.1 水曲柳生物学特 1
1.2 水曲柳的经济和生态价值 1
1.3 水曲柳繁殖和组织培养研究进展 2
1.3.1 水曲柳播种、扦插和嫁接繁殖现状 2
1.3.2 水曲柳组织培养研究现状 2
1.4 水曲柳组织培养研究存在的问题和发展前景 3
1.4.1 不同繁殖材料的繁殖潜力有差异 3
1.4.2 同种繁殖材料体胚发生潜力差异的分子机制尚不清楚 4
1.4.3 组培苗率和存活率低 4
1.4.4 水曲柳组织培养研究的发展前景 4
2 水曲柳种子无菌发芽与胚轴离体 6
2.1 水曲柳种子采集与处理 6
2.2 器械的洗涤和 7
. 培养基配制 7
2.4 培养步骤与培养条件 7
2.5 水曲柳种子无菌发芽与下胚轴离体 8
2.5.1 水曲柳种子无菌发芽 8
2.5.2 水曲柳下胚轴的离体 9
2.6 结论 18
3 水曲柳不定芽发生和腋芽增殖途径的植株 20
3.1 材料采集 20
3.2 外植体消毒与切割 20
3.3 培养基配制 21
3.4 培养步骤与培养条件 22
3.5 水曲柳不定芽发生培养结果 22
3.5.1 外植体类型对不定芽发生的影响 22
3.5.2 细胞分裂素对下胚轴不定芽发生的影响
3.5.3 生长素对下胚轴不定芽发生的影响
3.6 水曲柳腋芽增殖培养结果 24
3.6.1 外植体类型对腋芽增殖的影响 24
3.6.2 培养基类型对腋芽增殖的影响 24
3.6.3 6-BA浓度对腋芽增殖的影响 24
3.6.4 NAA浓度对腋芽增殖的影响 25
3.7 水曲柳微枝生根培养结果 25
3.8 炼苗和移栽 26
3.9 结论 27
4 水曲柳离体根培养体系的建立 28
4.1 水曲柳离体根培养的材料与方法 28
4.1.1 水曲柳实生苗根尖 28
4.1.2 水曲柳无菌苗根尖 28
4.2 水曲柳离体根培养的结果与分析 29
4.2.1 水曲柳实生苗离体根培养的影响因素 29
4.2.2 水曲柳无菌苗胚根离体培养的影响因素 30
4.. 水曲柳无菌苗根尖离体培养的影响因素 32
4.2.4 水曲柳无菌苗根尖愈伤组织诱导的影响因素 37
4.3 结论 40
5 水曲柳合子胚子叶愈伤组织诱导和增殖的影响因素 42
5.1 水曲柳愈伤组织诱导和增殖的材料与方法 43
5.1.1 材料预处理 43
5.1.2 预培养方法 43
5.1.3 愈伤组织诱导培养方法 43
5.1.4 愈伤组织增殖培养方法 43
5.2 水曲柳愈伤组织诱导和增殖的结果与分析 44
5.2.1 水曲柳愈伤组织诱导材料预培养 44
5.2.2 植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响 45
5.. 基因型对愈伤组织增殖的影响 46
5.2.4 植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响 47
5.3 结论 48
6 水曲柳体胚发生和植株 50
6.1 水曲柳体胚发生的材料与方法 50
6.1.1 实验材料 50
6.1.2 实验方法 51
6.1.3 组织细胞学观察方法 52
6.1.4 体胚萌发培养方法 52
6.1.5 体胚苗移栽和驯化方法 52
6.2 水曲柳体胚发生与植株的结果与分析 52
6.2.1 种子采集时间对水曲柳体胚发生的影响 52
6.2.2 基本培养基对水曲柳体胚发生的影响 53
6.. 植物生长调节剂对水曲柳体胚发生的影响 54
6.2.4 蔗糖对水曲柳体胚发生的影响 55
6.2.5 水曲柳体胚发生的细胞组织学观察 56
6.2.6 水曲柳体胚萌发与转苗 57
6.2.7 水曲柳体胚苗移栽和驯化 58
6.3 结论 58
7 水曲柳合子胚与体胚发生的细胞学观察 59
7.1 材料与方法 59
7.1.1 实验材料 59
7.1.2 水曲柳合子胚发生的细胞学观察方法 59
7.1.3 水曲柳体胚的诱导方法 60
7.1.4 水曲柳体胚发生的细胞学观察方法 60
7.2 结果与分析 60
7.2.1 合子胚发生的细胞学观察 60
7.2.2 体胚发生的细胞学观察 62
7.3 结论 63
8 外植体母树来源对水曲柳体胚发生的影响 64
8.1 材料与方法 64
8.1.1 材料采集与处理 64
8.1.2 水曲柳体胚发生培养方法 65
8.1.3 继代培养与增殖培养方法 65
8.2 结果与分析 65
8.2.1 不同采种母树未成熟合子胚子叶外植体的体胚发生潜力比较 65
8.2.2 激素组合对未成熟合子胚子叶外植体体胚发生的影响 66
8.. 母树来源对未成熟合子胚子叶愈伤组织诱导的影响 68
8.2.4 激素组合对未成熟合子胚子叶愈伤组织诱导的影响 70
8.2.5 激素组合与母树来源对未成熟合子胚子叶外植体体胚发生的交互作用 72
8.2.6 不同地区母树来源成熟合子胚体胚发生 73
8.2.7 同一地区不同母树来源成熟合子胚体胚发生 74
8.2.8 不同母树成熟合子胚体胚发生 76
8.2.9 水曲柳成熟合子胚与未成熟合子胚子叶外植体的体胚发生效果比较 78
8.3 结论 79
9 外植体取材时期对水曲柳体胚发生的影响 80
9.1 材料与方法 80
9.1.1 材料 80
9.1.2 主要试剂 81
9.1.3 方法 81
9.1.4 外植体培养步骤 82
9.2 结果与分析 83
9.2.1 未成熟合子胚的体胚诱导培养 83
9.2.2 成熟合子胚的体胚发生培养 88
9.. 体胚的成熟培养 89
9.2.4 体胚的萌发培养 89
9.2.5 体胚苗的生根 90
9.2.6 炼苗和移栽 91
9.3 结论 91
10 水曲柳体胚发生的同步化调控 92
10.1 材料与方法 93
10.1.1 材料采集与处理 93
10.1.2 培养基配制与培养条件 93
10.1.3 同步化调控方法 93
10.1.4 数据统计分析方法 94
10.2 结果与分析 94
10.2.1 渗透压对水曲柳体胚发生同步化的影响 95
10.2.2 低温对水曲柳体胚同步化发生的影响 99
10.. 脱落酸对水曲柳体胚同步化的影响 102
10.2.4 不同处理对水曲柳子叶胚同步化发生和畸形胚发生的调控效果比较 104
10.2.5 水曲柳体胚的萌发与生根 106
10.3 结论 110
11 抗褐化剂对水曲柳子叶外植体褐化及体胚发生的影响 111
11.1 材料与方法 111
11.1.1 研究材料与体胚诱导 111
11.1.2 抗褐化剂处理 112
11.2 结果与分析 112
11.2.1 PVP、L-Glu和AgNO3对水曲柳成熟合子胚子叶外植体褐化及体胚发生的影响 112
11.2.2 抗坏血酸对水曲柳成熟合子胚子叶外植体体胚发生的影响 115
11.. 抗坏血酸对水曲柳成熟合子胚子叶外植体褐化的影响 116
11.3 结论 117
12 抗褐化剂对水曲柳体胚发生过程中外植体生理生化的影响 118
12.1 材料与方法 118
12.1.1 研究材料和体胚诱导 118
12.1.2 抗褐化剂处理 119
12.2 PVP、L-Glu和AgNO3对水曲柳外植体生理生化的影响 119
12.2.1 PVP、L-Glu和AgNO3对外植体多酚含量和PPO活的影响 119
12.2.2 PVP、L-Glu和AgNO3对外植体抗氧化酶SOD和POD活的影响 120
12.. PVP、L-Glu和AgNO3对外植体MDA含量的影响 121
1. 外源 ASA对水曲柳外植体生理生化的影响 121
1..1 外源 ASA对外植体多酚含量和PPO活的影响 121
1..2 外源 ASA对外植体PAL活的影响 122
1.. 外源 ASA对外植体ASA合成代谢的影响 122
1..4 外源 ASA对外植体APX活的影响 125
1..5 外源 ASA对外植体细胞内活氧代谢的影响 125
1.. 外源 ASA对外植体细胞内MDA含量的影响 127
1.. 外源 ASA对外植体细胞内NO合成的影响 127
12.4 结论 128
13 水曲柳体胚发生伴随外植体褐化的生理机制及差异蛋白 129
13.1 材料与方法 129
13.1.1 材料采集与体胚诱导 129
13.1.2 蛋白样品制备 130
13.1.3 蛋白质的分离 130
13.2 结果与分析 132
13.2.1 蛋白质的分离 132
13.2.2 实际等电点与分子质量分析 133
13.. 不同样品蛋白点表达比较分析 135
13.2.4 蛋白点质谱鉴定结果 137
13.3 结论 143
14 不同取材时期水曲柳合子胚DNA甲基化及体胚发生状态 144
14.1 材料与方法 145
14.1.1 不同取材时期水曲柳合子胚子叶诱导体胚发生 145
14.1.2 不同取材时期水曲柳合子胚子叶基因组DNA甲基化 146
14.2 结果与分析 152
14.2.1 不同取材时期水曲柳合子胚体胚发生状态 152
14.2.2 不同取材时期水曲柳合子胚 DNA甲基化 157
14.3 结论 163
15 水曲柳体胚成熟及萌发促进研究 164
15.1 材料与方法 164
15.1.1 水曲柳直接体胚发生中的体胚成熟培养 164
15.1.2 水曲柳间接体胚发生中的愈伤组织分化培养 165
15.1.3 水曲柳间接体胚发生中的体胚成熟培养 165
15.1.4 水曲柳体胚萌发生根培养 165
15.1.5 水曲柳植株移栽成苗 165
15.2 结果与分析 166
15.2.1 水曲柳直接体胚发生中的体胚成熟培养 166
15.2.2 水曲柳间接体胚发生中的愈伤组织分化培养 173
15.. 水曲柳间接体胚发生中的体胚成熟培养 175
15.2.4 适宜水曲柳萌发培养的材料 177
15.2.5 继代次数与水曲柳体胚萌发培养的关系 178
15.2.6 继代次数与水曲柳体胚生根培养的关系 178
15.2.7 外源添加物质对水曲柳体胚生根的影响 179
15.2.8 水曲柳植株移栽成苗 180
15.3&nb
本书共章，简要介绍白蜡树属植物和水曲柳繁育生物学研究现状，尤其是组织培养技术研究现状。重点介绍水曲柳组织培养技术和原理研究的近期新进展。包括水曲柳的无菌发芽与胚轴的离体、水曲柳不定芽和腋芽增生途径的植株、水曲柳不定芽增殖培养的影响因素、水曲柳不定芽发生的调控机理、水曲柳腋芽离体萌发与增殖培养影响因素，水曲柳离体根培养体系的建立、水曲柳愈伤组织诱导和增殖影响因素分析、水曲柳未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株，并对水曲柳合子和体细胞胚胎发生发育的形态学、组织细胞学、生物化学、生理学和分子生物学的近研究进展进行了阐述。本书对植物的组织培养研究具有借鉴作用，对我国无系林业发展、植物工厂化生产和优良植物资源的可持续发展具有启示意义。
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