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全新组织和细胞培养技术(第4版/)刘玉琴9787117316859
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章 绪论 节 组织培养的诞生与发展简史 第二节 组织培养的优点、局限及发展方向 一、组织培养的优点 二、组织培养的局限 三、组织培养的可能发展方向 第三节 组织培养常用术语 第四节 组织培养常用缩写词第二章 细胞培养基本条件 节 细胞培养实验室的建立 一、实验室设计原则与要求 二、实验室的布局 三、细胞培养实验室的基本设备 第二节 培养仪器和材料 一、常用仪器设备 二、培养器皿与材料 三、培养用品的清洗和消毒 第三节 培养用液 一、培养基 二、培养用液 三、细胞培养所用液体的与保存第三章 细胞培养基本技术 节 细胞传代 一、血细胞板 二、仪 第二节 细胞形态观察 一、显微镜观察 二、流式细胞仪技术 第三节 细胞的冻存、复苏和运输 一、细胞的冻存 二、细胞的复苏 三、细胞的运输第四章 机体各种组织的体外原代培养 节 上皮组织 一、内皮细胞的培养 二、单层柱状上皮细胞的培养 三、复层纤毛柱状上皮细胞的培养 四、复层扁平上皮细胞的培养 第二节 结缔组织 一、成纤维细胞的培养 二、巨噬细胞的培养 三、脂肪细胞的培养 四、肥大细胞的培养 五、血细胞的培养 六、淋巴细胞的培养 七、软骨细胞的培养 八、骨细胞的培养 第三节 肌组织 一、心肌细胞的培养 二、平滑肌细胞的培养 三、骨骼肌细胞的培养 第四节 神经组织 一、神经元的培养 二、神经胶质细胞的培养第五章 干细胞培养 节 胚胎干细胞培养及鉴定 第二节 神经干细胞培养及鉴定 一、胚胎和成年神经干细胞的发育 二、神经干细胞的培养方式 第三节 造血干细胞 一、造血干细胞的定义及生物学特征 二、造血干细胞的分离及培养 第四节 间充质干细胞 第五节 表皮组织干细胞 一、表干细胞的培养 二、表皮干细胞的鉴定 三、人毛囊干细胞的培养 第六节 诱导型干细胞的建立及鉴定第六章 器官培养 节 器官培养的要求及特点 第二节 器官培养的方法及应用 一、固体培养基器官培养法 二、液体培养基器官培养法 三、动态器官培养法 四、体内器官培养法 第三节 三维细胞培养技术 一、3D细胞培养技术的关键因素 二、3D细胞培养方法第七章 细胞建系和鉴定 节 正常细胞系的建立和鉴定 一、正常细胞系建立程序 二、正常细胞系建立的例 三、建立正常细胞系的讨论和小结 四、正常细胞系的鉴定 五、正常细胞系鉴定讨论及小结 第二节 肿瘤细胞系、转化细胞系的建立和鉴定 一、肿瘤细胞系的建立 二、肾透明细胞癌细胞建系的例 三、转化细胞系建立 四、肿瘤细胞和转化细胞建系讨论和小结 五、肿瘤细胞系和转化细胞系的鉴定第八章 培养细胞的质量控制 节 培养细胞的微生物检测 一、培养细胞的无菌检测 二、培养细胞的支原体检测 三、培养细胞的病毒检测 第二节 培养细胞的种属鉴定 一、同工酶法 二、染色体法 三、PCR法 第三节 人源细胞的身份认定第九章 培养细胞常用检测分析 节 细胞培养的生长测定 一、细胞法 二、台盼蓝染色法 三、MTT比色法 四、CCK-8比色法 五、细胞生长曲线法 六、[H]-TdR掺入法 七、BrdU掺入法 八、细胞集落培养 第二节 细胞周期分析 一、细胞周期概述 二、细胞周期调控 三、细胞同步化方法 四、细胞周期分析 第三节 细胞运动、侵袭能力观察 一、吞噬轨迹法 二、刮痕修复法 三、Transwell法 第四节 细胞衰老 一、衰老相关B-半乳糖苷酶活检测 二、端粒长度的测定 三、错配修复基因的测定 四、微卫星不稳定的测定 第五节 凋亡研究 一、细胞凋亡的形态学研究方法 二、细胞凋亡的生物化学研究方法 三、细胞凋亡的免疫化学分析方法 四、细胞凋亡的分子生物学研究方法 第六节 细胞的基因修饰 一、磷酸钙沉淀法 二、脂质体转染 三、电穿孔转染技术 四、病毒介导的基因转移技术 五、筛选细胞克隆第十章 细胞融合与单克隆抗体制备 节 单克隆抗体制备的基本原理 第二节 小鼠-小鼠B淋巴细胞杂交瘤 一、融合用细胞的制备 二、细胞融合 三、杂交瘤细胞的筛选 四、特异抗体的检测 五、杂交瘤细胞的克隆化 六、杂交瘤细胞的冻存 七、单克隆抗体类型的鉴定 八、单克隆抗体的大量制备 九、小鼠单克隆抗体的纯化 第三
刘玉琴,研究员,博士生导师,中农工主员。任《中华病理学杂志》编委、靠前细胞系质量认委员会(ICLAC)委员。曾任中华医学会病理学分会委员,中国病理牛理学会肿瘤专业委员会委员,中国抗癌协会肿瘤生物治疗专业委员会委员,中国抗癌协会肿瘤转移专业委员会务员等。长期从事肿瘤侵袭转移的机制研究,强调肿瘤研究应从不同层次系统研究,如进行分子、细胞、体内、体外模型研究系统的联合应用。近年来,以“癌细胞侵袭转移、复发机制及预防措施”为研究方向,先后参与了20余项科研工作,建立了肿瘤复发转移模型及肿瘤休眠模型,利用新型肿瘤疫苗治疗肿瘤的复发/转移,利用组织/基因芯片开展肿瘤转移相关基因的寻找与验肿瘤干细胞特研究等。曾获得卫生部科学技术进步奖三等奖2次,已发表120余篇。主编及参加编写专著20余部,包括《癌的侵袭与转移基础与临床》《实验细胞资源目录》《细胞培养实验手册》《实验细胞资源的描述标准与管理规范》等,以及全国高等学校医学教材《组织和细胞培养技术》(第3版),参加翻译《人肿瘤细胞培养》《干细胞生物学》《细胞治疗》等;同时也是课程实验肿瘤学及组织培养的负责人。致力于实验细胞资源的收集保藏和资源库的运行管理。作为实验细胞资源共享平台的负责人,全面负责平台建设及运行服务。平台开展实验细胞资源的保藏及标准化整理、整合与共享;并已制定、完善了各种管理规章及标准操作规程。实验室自建多种特殊细胞资源,包括6株中国人肾癌细胞、规律成簇间隔短回文重复相关蛋白核酸酶9(Cas9)稳定表达的170余株近20种肿瘤细胞、永生化的脐静脉血管内皮细胞,以及多种荧光蛋白/荧光素酶标记的细胞等。实验细胞资源共享平台已为全国科研、教学、疾病预防控制机构和生物制药企业提供资源实物服务10万余株次。
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