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全新流式细胞术陈朱波,曹雪涛 著9787030390974
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序
第二版前言
版前言
1概述
1.1流式细胞术基本概念
1.2分析型流式细胞仪介绍
1.3分选型流式细胞仪介绍
参考文献
2流式细胞仪的原理
2.1液流系统
2.2光路系统
.检测分析系统
2.4分选系统
参考文献
3流式图
3.1流式通道
3.2流式直方图
3.3流式散点图
3.4流式等高线图
参考文献
4流式细胞术的基本操作与技巧
4.1样品制备
4.1.1独立细胞样品制备
4.1.2免疫器官样品制备
4.1.3实体脏器样品制备
4.2荧光素偶联抗体及其标记方法
4.2.1荧光素
4.2.2荧光素偶联抗体
4..样品封闭
4.2.4荧光素偶联抗体标记
4.3光电倍增管电压设定
4.4对照的设置
4.4.1阴对照的设置
4.4.2FMO对照
4.4.3阳对照的设置
4.5补偿调节
4.5.1补偿调节的原理
4.5.2调节补偿的具体方法
4.5.3三色和四色分析补偿调节方法
4.5.4影响补偿大小的因素
4.6阈值设定
4.7流式分析中的死细胞问题
4.7.1减少样品中死细胞比例的方法
4.7.2流式分析时区分死细胞和活细胞的方法
4.8流式分选模式选择
4.8.1纯化模式
4.8.2富集模式
4.8.3单细胞模式
4.9上样速度控制
4.9.1流式分析速度控制
4.9.2流式分选速度控制
4.10分选设门基本原则
4.11流式分选基本步骤
参考文献
5流式分析术的应用
5.1细胞群比例测定
5.2表型测定
5.3检测细胞因子
5.3.1胞内染色法检测细胞因子
5.3.2胞内染色法与ELISA法比较
5.3.3CBA法测定细胞因子
5.3.4CBA法与ELISA法比较
5.4检测细胞增殖
5.4.1相对法
5.4.2示踪染料标记法
5.4.3BrdU和EdU掺入法
5.4.4方法
5.5检测细胞凋亡
5.5.1annexin V/PI双染色法
5.5.2SYTO/PI双染色法
5.5.3细胞DNA含量分析法检测细胞凋亡
5.5.4线粒体损伤检测法
5.5.5活化的caspase—3检测法
5.5.6荧光素偶联的caspase抑制剂(FLICA)标记法
5.5.7甲酰胺诱导ssDNA单抗检测法
5.5.8TUNEL法
5.6检测细胞周期
5.6.1非特异核酸荧光染料标记法
5.6.2特异细胞周期调节蛋白检测法
5.7检测细胞能
5.8检测细胞吞噬功能
5.9检测胞内活化的激酶
5.10检測细胞自噬
5.11检测基因表达
5.11.1GFP报告基因系统
5.11.2lacZ报告基因系统
5.11.3β—内酰胺酶报告基因系统
5.11.4新型膜结合型报告分子系统
5.12检测细胞内两种蛋白质的直接结合
5.12.1荧光共振能量转移结合流式细胞术检测两种蛋白质的直接结合
5.12.2双分子荧光互补结合流式细胞术检测两种蛋白质的直接结合
5.13微生物学中的应用
5.13.1荧光素偶联抗体直接检测法
5.13.2抗体结合人工荧光微球直接检测法
5.13.3微生物活流式检测
5.13.4人工微球荧光免疫试验检测抗体
5.13.5荧光原位杂交流式检测法
5.13.6PCR免疫微珠法
5.13.7原位PCR杂交流式检测法
5.14检测钙相关分子
5.14.1检测细胞内游离的钙离子水平
5.14.2检测钙蛋白酶活
5.14.3检测细胞膜钙泵活
5.15表观遗传学中的应用
5.15.1ChIP—on—beads法
5.15.2检测细胞水平组蛋白修饰情况
5.16检测缝隙连接介导的细胞通讯
5.17检测细胞内pH值和钠氢体活
5.17.1检测细胞内pH值
5.15.2检测钠氢体活
5.18应用
5.18.1检测活氧簇
5.18.2检测细胞内游离的锌离子水平
5.18.3检测端粒长度
5.18.4检测脂筏结合蛋白
引文目录
参考文献
6流式分选术的应用
6.1流式分选与磁分选
6.2流式分选独立群体细胞
6.3流式分选非独立细胞群体
6.4流式分选低比例细胞群体
6.4.1强势细胞群的辐影响
6.4.2流式分选结合磁分选
6.4.3二次分选法
6.5流式分选干细胞
6.5.1流式分选造血干细胞
6.5.2流式分选侧群干细胞
6.5.3流式分选间充质干细胞
6.5.4流式分选肿瘤干细胞
参考文献
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