正版新书]黑腹果蝇模型的研究应用汪晓纯9787522910321

章  果蝇翅发育研究

1   绪论 3

   1. 1   引言 3

   1. 2   果蝇翅的组织发育 4

      1. 2. 1   果蝇的翅膀结构 4

      1. 2. 2   果蝇翅脉的命名 9

      1. .    果蝇翅原基的隔间划分与器官成形素 11

      1. 2. 4   器官成形素相关的信号通路 13

      1. 2. 5   果蝇翅脉的形成 21

   1. 3   果蝇平面细胞极 22

   1. 4   果蝇翅膀的组织修复

   1. 5   ancho 基因的研究进展

   1. 6   jumu 基因的研究进展 24

   1. 7   本研究的目的与意义 25

2   Ancho 在果蝇翅发育的能研究 27

   2. 1   材料与方法 27

      2. 1. 1   实验材料 27

      2. 1. 2   实验方法 28

   2. 2   结果与分析 34

      2. 2. 1   ancho 基因的位点与同源分析 34

      2. 2. 2   低表达 ancho 基因对翅脉的发育的影响 34

      2. .    低表达 ancho 基因对翅膀面积的影响 36

      2. 2. 4   低表达 ancho 基因分别对幼虫期与蛹期翅发育的影响 38

2. 2. 5   Ancho 在翅膀中的定位 40

      2. 2. 6   Ancho 低表达翅原基的细胞增殖分析 40

      2. 2. 7   低表达 ancho 翅原基中 BMP 信号靶基因表达量分析 42

      2. 2. 8   Ancho 低表达对蛹期前体翅脉的影响 43

      2. 2. 9   BMP 信号通路的上位效应分析 45

      2. 2. 10   Ancho 作用于 BMP 信号配体具有选择 48

   .    讨论 49

   2. 4   小结 5

   Jumu 在果蝇翅发育的能研究 53

   3. 1   材料与方法 53

      3. 1. 1   实验材料 53

      3. 1. 2   实验方法 53

   3. 2   结果与分析 54

      3. 2. 1   jumu 突变体成虫翅膀表型分析 54

      3. 2. 2   Jumu 在幼虫与蛹期翅膀中的定位 57

      3. .    jumu 低表达翅原基的细胞凋亡 58

      3. 2. 4   低表达 jumu 翅原基的 JNK 信号分析 58

      3. 2. 5   JNK 信号的上位效应实验 62

      3. 2. 6   降低 jumu 翅原基 Wnt 信号的分析 64

      3. 2. 7   jumu 突变体多刚毛表型分析 64

      3. 2. 8   Rh 过表达的恢复实验 65

   3. 3   讨论 68

   3. 4   小结 70

   3. 5   结论 71

第2 章  果蝇的天然免疫研究

1   绪论 75

   1. 1   黑腹果蝇研究进展 75

   1. 2   果蝇的天然免疫 76

1. 2. 1   体液免疫 76

      1. 2. 2   细胞免疫 77

      1. .    黑化反应 78

   1. 3   Notch 信号转导通路对天然免疫的影响 79

   1. 4   E (spl) 基因的研究进展 79

   1. 5   CG7510 基因的介绍 80

   1. 6   P 因子系统 81

      1. 6. 1   P 因子简介 81

      1. 6. 2   P 因子在果蝇中的应用 82

   1. 7   果蝇模型在食品添加剂安全检测中的应用 82

   1. 8   本研究的目的及意义 84

2   材料 86

   2. 1   果蝇品系及培养方法 86

      2. 1. 1   果蝇的野生型品系及突变体品系 86

      2. 1. 2   培养方法 86

   2. 2   病原体 86

      2. 2. 1   病原体种类 86

      2. 2. 2   荧光标记的病原体 87

   .    试剂与培养基 87

      . . 1   试剂 87

      . . 2   培养基 87

   2. 4   主要仪器 88

3   实验方法 89

   3. 1   成虫的生存率 89

   3. 2   成虫血细胞的噬菌作用 89

   3. 3   分析浆细胞的数量 89

   3. 4   果蝇总 RNA 提取 90

   3. 5   RNA 反转录为 cDNA 90

   3. 6   RT-PCR 检测血细胞发育相关基因 91

3. 7   定量 PCR 测定肽的表达量 92

   3. 8   幼虫血细胞的吞噬作用 93

   3. 9   血细胞肌动蛋白染色 93

   3. 10   P 因子切除技术获得低表达突变体 94

   3. 11   果蝇基因组 DNA 的提取方法 95

   3. 12   PCR 检测 P 因子切除情况 96

   3. 13   RT-PCR 检测制备突变体 CG7510 的表达量 97

   3. 14   食品添加剂安全果蝇检测模型 97

4   结果与分析 99

   4. 1   E (spl) 基因对果蝇天然免疫的影响 99

      4. 1. 1   E (spl) 基因对果蝇生存率的影响 99

      4. 1. 2   E (spl) 突变体血细胞噬菌功能降低 100

      4. 1. 3   E (spl) 突变体血细胞数量异常增加 101

      4. 1. 4   E (spl) 基因对体液免疫的影响 102

   4. 2   CG7510 基因对果蝇天然免疫的影响 103

      4. 2. 1   CG7510 突变体幼虫血细胞吞噬作用降低 103

      4. 2. 2   CG7510 突变体血细胞肌动蛋白分布异常 104

      4. .    血细胞发育相关基因的检测 105

  4. 3  检测低表达突变体CG7510 mRNA 的表达量 106

   4. 4   低表达 CG7510 突变体的制备 106

      4. 4. 1   纯合突变体果蝇的筛选 107

      4. 4. 2   CG7510 突变体 mRNA 水平检测 109

   4. 5   食品添加剂对果蝇的影响 110

      4. 5. 1   三龄幼虫期食品添加剂对果蝇的生长影响 110

      4. 5. 2   蛹期食品添加剂对果蝇的生长影响 110

      4. 5. 3   成虫期食品添加剂对果蝇的生长影响 112

      4. 5. 4   食品添加剂对果蝇后代的存活能力的影响 112

      4. 5. 5   食品添加剂对果蝇成虫行为能力的影响分析 114

5   讨论 116

   5. 1   E (spl) 对果蝇天然免疫的影响 116

   5. 2   CG7510 对果蝇天然免疫的影响 117

   5. 3   CG7510 对果蝇血细胞发育的影响 118

   5. 4   CG7510 新型突变体的构建 119

   5. 5   结论 120

参考文献 1

汪晓纯，黑龙江八一农垦大学教师，2019年获东北林业大学遗传学专业理学博士，从事果蝇的与果蝇天然免疫研究。发表SCI2篇（均为二区，累计影响因子7.8），主持厅局级课题1项，参与省部级课题2项。