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正版 PPARγ调控乳脂肪合成的研究/生命科学系列丛书 刘莉莉著 黑
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章绪论1
1.1乳脂肪合成机理3
1.2乳脂肪降低理论10
1.3乳脂肪代谢的转录调控因子14
1.4乳脂肪合成的转录调控因子20
1.5神经内分泌系统对乳脂肪合成的调控22
1.6脂肪酸对乳脂肪合成的调控25
1.7乳脂肪合成的影响因素28
第2章乳腺组织乳脂肪合成相关基因和蛋白表达35
2.1乳腺组织乳脂肪合成相关基因表达37
2.2乳腺组织乳脂肪合成转录调控因子及相关蛋白表达39
2.3不同泌乳品质奶牛乳腺组织乳脂肪合成相关基因表达和蛋白表达分析40
第3章乳脂肪合成前体物对乳腺上皮细胞乳脂肪合成的影响43
3.1乳腺上皮细胞原代培养及鉴定45
3.2乳脂肪合成前体物对乳腺上皮细胞乳脂肪合成的影响46
……
刘莉莉,黑龙江人,东北农业大学动物生物化学与分子生物学专业博士。2007年7月至今,工作于黑龙江中医药大学生物技术制药教研室,从事分子生物学、生物技术原理、生物技术制药、现代生物技术概论、药学生物技术概论、生物药物分离纯化等多门理论课程和实验课程的教学,有扎实的理论基础,并擅长分子生物学实验、动物细胞培养和基因的功能研究等。
本书采用组织块培养法构建奶牛乳腺上皮细胞(DCMECs)模型。DCMECs添加乳脂肪合成前体物乙酸钠、β-羟基丁酸钠、乙酸钠和β-羟基丁酸钠混合物、软脂酸和硬脂酸,qRT-PCR检测DCMECs脂肪酸摄取、转运、活化相关蛋白基因、脂肪酸从头合成、去饱和酶基因、甘油三酯合成酶相关基因和乳脂肪合成转录调控因子相关基因的mRNA表达,Western blotting检测乳脂肪合成转录调控因子的蛋白表达,酶活性试剂盒检测甘油三酯合成酶活性变化,采用细胞免疫荧光法检测PPARγ的胞内定位情况。对DCMECs 的PPARγ进行基因沉寂和超表达,通过培养基中甘油三酯含量确定PPARγ基因沉寂和超表达的DCMECs对各脂肪酸的浓度需求变化,同时采用qRT-PCR、Western blotting和酶活性试剂盒检测各脂肪酸对PPARγ基因沉寂和超表达的DCMECs乳脂肪合成相关基因表达、转录调控因子蛋白表达及甘油三酯合成酶活性的影响。
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